9月8日上午，由江苏省农业科学院主办、南京天邦生物科技有限公司承办的首届猪支原体肺炎防控国际论坛继续进行。上午半天的会议由江苏省农业科学院刘茂*研究员主持。
今天上午会议主持人：江苏省农业科学院刘茂*研究员
猪肺炎支原体入侵上皮细胞的机制研究
未来，抗生素的限用甚至禁用在国内外是大势所趋，因此，需要寻找替代抗生素的方式来控制猪肺炎支原体的感染。那么，猪支原体肺炎（猪气喘病）是怎么发生的？国际支原体组织（IOM）主席、澳大利亚悉尼理工大学传染病学教授Dr.StevenDjordjevic的报告阐述了猪肺炎支原体入侵上皮细胞的机制研究。Dr.StevenDjordjevic说：“在过去50年中关于猪支原体肺炎的研究，虽然获得了很大的进步，但我们仍然需要研究更好的疫苗、药物，也需要更好地理解猪肺炎支原体的致病机制。”
国际支原体组织（IOM）主席、澳大利亚悉尼理工大学传染病学教授Dr.StevenDjordjevic：猪肺炎支原体入侵上皮细胞的机制研究
Dr.StevenDjordjevic指出，猪的疾病主要是呼吸道疾病和胃肠道疾病，猪肺炎支原体是一种给全世界养猪产业造成巨大经济损失的胞外病原菌，它可以引起纤毛摆动停滞、内皮细胞死亡、损伤黏膜纤毛活动梯，并且为后续病原的感染提供合适的微环境。
有报道称，支原体感染部位主要是纤毛顶端，而纤毛的作用是将痰液和黏液从呼吸道下端运送至上端，继而进入消化道，其中的胃酸将消灭这些病原。一些报告称，猪肺炎支原体可以从感染猪的心包膜、肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结等肺外组织中分离到，肺脏只是猪肺炎支原体最先入侵的脏器。根据反向遗传学，可以看出，猪肺炎支原体表面有种特异性蛋白，包括P97和P基因，猪肺炎支原体不能自身合成胆固醇，因此它必须和宿主细胞紧密结合才可以合成这些自身必须的物质。
猪肺炎支原体是一个比较复杂的病原菌，它可以通过翻译后加工处理的机制在细胞表面产生多功能的蛋白片段，从而改变许多表面蛋白。在最近12年中，我们发现，支原体已经发生了较大变异，其中表面的特异性蛋白已经远远超过了个，一些特异性蛋白的结构和功能也发生了变化。我们还发现，支原体的很多表面蛋白都可以和纤毛表面蛋白进行结合，其中P97和P这两种蛋白和纤毛的结合力最强。
猪肺炎支原体可以在呼吸道上皮定植，并通过宿主喷出的含微量氧气的黏膜液滴传播到其他宿主。一项检测猪肺炎支原体是否可以侵入猪上皮样细胞系（PK-15细胞）的研究结果显示，猪肺炎支原体具备侵入呼吸道上皮的能力。进一步研究发现，P97蛋白可以和纤毛表面的肌动蛋白结合。
演讲结束后，Dr.StevenDjordjevic在解答现场观众提问时表示，他们正在研究是否支原体菌株很小的关键的突变，就会影响肺炎支原体在纤毛定植的能力。
分子流行病学监测手段
瑞士伯尔尼大学教授Dr.FreyJoachim从分子流行病学层面解析了净化猪支原体肺炎（猪气喘病）的关键因素。
瑞士伯尔尼大学教授Dr.FreyJoachim介绍分子流行病学监测手段：一项净化猪气喘病的关键技术
对于猪气喘病的防控，使用抗生素治疗是常用的措施，Dr.FreyJoachim建议大家停止用药，因为抗生素的使用并不能清除猪肺炎支原体。
要根除猪肺炎支原体，必须做到特异性、灵敏性的诊断，以及分子流行病学追踪感染源。由于猪肺炎支原体和絮状支原体同属于柔膜菌纲第三分支，因此，要特异、灵敏地检测和诊断猪肺炎支原体，PCR方法中选择的检测靶向基因应存在于所有的猪肺炎支原体菌株中，但不存在于絮状支原体中。研究发现，可以从肺组织或鼻拭子中直接检测猪肺炎支原体P基因编码的可变区域；利用多聚丝氨酸序列分型进行分子流行病分析的优势是检测速度很快，成本也很低，但是也有缺点，不能用于进化研究；利用多位点序列分型（MLST）分析猪肺炎支原体菌株提示有相当大程度的变异性。
Dr.FreyJoachim强调，高特异性和灵敏性地从肺组织和鼻拭子中检测猪肺炎支原体在监测和净化程序中有重要意义。猪气喘病的防控不仅要包括大型养殖场和繁育场，还要包括小规模家庭农场和野生动物。
显然，直接从临床样品DNA检测猪肺炎支原体的分子流行病学分析为疫情的蔓延和再暴发提供了快速的感染源信息。
猪支原体肺炎活疫苗佐剂研制及肌肉注射免疫效力研究
江苏省农业科学院兽医研究所熊祺琰博士：猪支原体肺炎活疫苗佐剂研制及肌肉注射免疫效力研究
江苏省农业科学院兽医研究所熊祺琰博士对猪支原体肺炎活疫苗（株）佐剂的研制及肌肉注射免疫效力研究进行了详细介绍。
熊祺琰博士提出，疫苗接种是猪支原体肺炎最有效的控制手段，在研究过程中，通过新型佐剂提升猪支原体肺炎活疫苗（株）肌肉注射免疫的功效，其技术难点在于，不能影响活疫苗活力，而且要有效激活细胞免疫。
活疫苗肌肉注射免疫可提供有效攻*保护。肌肉注射与肺内注射在免疫应答方面有差异吗？研究发现，活疫苗肌注免疫后可在肺泡灌洗液（BALF）中检测到SIgA抗体的上升，说明肌肉注射可以诱导下呼吸道靶组织局部的黏膜抗体产生，可以诱导肺部局部免疫应答。
北美种猪场如何进行猪气喘病的净化？
美国明尼苏达大学兽医学院教授Dr.SamHolst：北美种猪场猪气喘病净化操作实施方案
北美种猪场如何进行猪气喘病的净化？据美国明尼苏达大学兽医学院教授Dr.SamHolst介绍，可以使用“最初”的瑞士减群法净化方案，在美国的支原体净化是使用封群加用药物控制的方法进行的，第二种方法是全群药物保健计划。这两种方法的区别在于使用第二种方法，猪场可以持续引进后备母猪。
Dr.SamHolst表示，全群封闭+全群用药可以让98%的猪在1年后保持阴性，而只用药不闭群的对照组只有59%的猪在1年后保持阴性；全群封闭的成本是7.5美元/头母猪，但是由于能在长时间内保持阴性，所以投资收益比是很合适的。
对于已经清除猪肺炎支原体的猪场，要持续监测后备母猪，保证后备母猪是阴性，同时对这些后备母猪进行疫苗免疫也是有必要的。此外，生物安全措施也非常重要。
最后，Dr.SamHolst在总结时表示，猪肺炎支原体的净化是可以做到的，天的封群对于封群联合药物控制方法净化猪肺炎支原体至关重要；全群药物控制也可以净化猪肺炎支原体，但重复稳定性较差。
现场观众提问
首届猪支原体肺炎防控国际论坛完美落幕
在会议闭幕式上，亚洲支原体组织（AOM）首届秘书长、江苏省农业科学院兽医研究所副所长邵国青研究员指出，本次会议内容